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如何做出符合顶级期刊要求的WB实验!

发布时间:2025-06-16点击量:22

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知名期刊WB实验投稿要求





1. Nature 系列期刊(如 Nature, Nature Cell Biology)

原文要求

"For western blots, provide uncropped scans of the most important blots in the Supplementary Information. Indicate molecular weight markers and specify the identity of each band. Antibody validation information must be provided, including catalog numbers, dilutions, and verification of specificity (e.g., siRNA knockdown, knockout controls)."
来源:Nature Author Guidelines


核心要求

    • 原始未裁剪条带必须上传至补充材料。

    • 标注分子量标记(Marker)及每条带对应的蛋白。

    • 抗体信息必须完整(货号、稀释比例、特异性验证方法)。


2. Cell 系列期刊(如 Cell, Molecular Cell)

原文要求

"Full scans of all western blots with molecular weight markers must be provided. Antibodies must be validated with genetic controls (e.g., CRISPR knockout, siRNA) where possible. Report the number of independent experiments and replicates."
来源:Cell Author Guidelines


核心要求

    • 提供带Marker的完整膜扫描图。

    • 抗体需通过基因水平验证(如敲除/敲低)。

    • 明确独立实验重复次数(n ≥ 3)。


3. Journal of Biological Chemistry (JBC)

原文要求

"Include uncropped images of blots with molecular weight markers. State the number of replicates and statistical analysis method. Antibody validation details (catalog #, lot #, dilution) are mandatory."
来源:JBC Instructions to Authors


核心要求

    • 提交未裁剪的原始条带图(含Marker)。

    • 注明重复次数与统计方法。

    • 提供抗体详细信息(货号、批号、稀释比)。


4. 《细胞与分子免疫学杂志》(中文核心)

原文要求

“Western Blot实验需提供完整膜扫描图,标注内参蛋白及目标蛋白位置。抗体来源、稀释比例及验证方法需明确。实验重复不少于3次。”
来源:期刊投稿指南


核心要求

    • 完整膜扫描图(含内参如β-actin/GAPDH)。

    • 抗体信息完整,重复次数≥3。


5. 《中国细胞生物学学报》

原文要求

“WB结果需展示原始全膜图,标明Marker及目标条带位置。抗体信息(公司、货号、稀释比)和实验重复次数需明确说明。”
来源:期刊投稿须知

核心要求

    • 提交原始全膜扫描图(含Marker)。

    • 抗体信息完整,实验重复≥3次。



WB实验初期合规设计指南


1. 实验设计阶段

抗体选择与验证

  • 使用经过验证的商业抗体(推荐CiteAb或独立验证数据)。

  • 进行抗体特异性验证(如敲除/敲低细胞、肽段阻断实验)。


对照设置

    • 每块胶必须包含:Marker + 内参 + 阴性对照(如空载细胞) + 阳性对照(如过表达样本)。


    重复次数:独立重复≥3次(非同一块胶上的重复孔)。



    2. 实验操作阶段

    样品制备

    • 使用蛋白酶/磷酸酶抑制剂,避免蛋白降解。

    • 定量后等量上样(BCA/Lowry法)。


    电泳与转膜

    • 使用预染Marker实时监控转膜效率。

    • 膜染色(如Ponceau S)验证转膜均匀性。


    抗体孵育:设置一抗/二抗阴性对照(如不加一抗)。



    3. 数据保存与记录

    原始图像:保存未调整亮度/对比度的扫描图(TIFF格式)。

    实验记录:详细记录抗体批号、曝光时间、软件处理步骤。



    常见问题与详细解决方案



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    投稿前自查清单

    ① 原始未裁剪WB全图(含Marker)已上传补充材料;

    ② 抗体信息完整(公司、货号、批号、稀释比);

    ③ 内参蛋白清晰可见且均匀;

    ④ 标注独立重复次数;

    ⑤ 提供抗体特异性验证方法(如KO数据);

    ⑥ 图中标明目标蛋白位置与分子量。



    晶莱生物WB实验服务


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    晶莱生物创立于2016年,拥有北京(北京晶莱华科生物技术有限公司)及长沙(湖南晶莱生物技术有限公司)两个研发机构,是专注于生物医药临床期前研发与基础医学科研服务的国家高新技术企业及专精特新企业。依托北京、长沙两地的3000余平实验平台,晶莱构建了8个研究平台,可为客户提供包括临床前CRO、动物寄养、动物模型构建、细胞型构建、药效及各类表型、机制、通路等全方位的研究服务。



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