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急性肾衰竭(ARF)动物模型

急性肾衰(acute renal failure,ARF)是由各种病因引起的肾功能快速下降而出现的临床综合征。根据病因发生的解剖部位可以分为:肾前性,肾性,肾后性。肾前性ARF指因各种原因引起肾实质血流灌注减少,导致 GFR 降低和肾小球滤过减少,约占 ARF 的55%。肾性 ARF 指出现肾实质损伤,以肾缺血和肾毒性药物或毒素导致的急性肾小管坏死(ATN)最为常见,其他还包括急性间质性肾炎(AIN),肾小球疾病和肾血管疾病等,约占 ARF 的 40%。肾后性 ARF 系尿路感染所致,梗阻可发生在从肾盂到尿道的尿路中任何部位,约占 ARF 的 5%。在过去的半个世纪中急性肾功能衰竭被认为是由肾缺血引起的血液动力学疾病,而这一观点的建立正是源于动物模型的发现。

急性肾衰(acute renal failure,ARF)是由各种病因引起的肾功能快速下降而出现的临床综合征。根据病因发生的解剖部位可以分为:肾前性,肾性,肾后性。肾前性ARF指因各种原因引起肾实质血流灌注减少,导致 GFR 降低和肾小球滤过减少,约占 ARF 的55%。肾性 ARF 指出现肾实质损伤,以肾缺血和肾毒性药物或毒素导致的急性肾小管坏死(ATN)最为常见,其他还包括急性间质性肾炎(AIN),肾小球疾病和肾血管疾病等,约占 ARF 的 40%。肾后性 ARF 系尿路感染所致,梗阻可发生在从肾盂到尿道的尿路中任何部位,约占 ARF 的 5%。在过去的半个世纪中急性肾功能衰竭被认为是由肾缺血引起的血液动力学疾病,而这一观点的建立正是源于动物模型的发现。


实验方法
① 卡那霉素模型:实验前大鼠禁水24h,然后按200mg/kg体重的剂量经肌肉注射卡那霉素,24h后采血测BUN、SCr。以BIJN>600mg/L,SCr>15mg/L作为模型建立成功标志。
② 庆大霉素模型:每天肌内注射庆大霉素100mg/kg体重,连续7d,即可完成庆大霉素肾毒性急性肾功能衰竭模型。按实验预定时间作动物尿量及尿常规检查,并采血作血BUN、SCr等的测定;同时取肾脏组织标本,经固定液固定后,作常规组织切片,置光镜下病理检查。

模型特点
模型大鼠BUN、SCr及尿N-乙酰-β- D氨基葡萄糖苷酶含量随给药时间的延长而逐渐增高。用药后第4日,模型动物尿中NAG酶及溶菌酶的排泄明显增多,血尿素氮开始升高,尿蛋白含量增多;第7日时血尿素氮、肌酐明显升高。镜下病理组织学观察显示,肾小管刷状缘微绒毛发生坏死脱落及融合,管腔中有细胞碎片,肾小管上皮细胞变性、坏死,肾间质中可见以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润。肾近曲小管上皮细胞的损伤可随用药时间而加重。

氯画汞诱导肾功能衰竭模型
实验方法
体重为2kg左右的成年新西兰兔,将 HgCl2用生理盐水新鲜配制成0.2%浓度的溶液,以5~15mg/kg体重的剂量经兔双后肢肌肉注射,连续2d。即可制备成急性肾功能衰竭(ARF)模型。本方法也可采用体重为200g左右的大鼠和体重为20g左右的小鼠作为模型动物, HgCl2注射剂量相同。按实验预定时间分别采血作血液生化测定,并取肾脏组织标本,经固定液固定后,作常规组织切片,置光镜下检查。

模型特点
模型动物注射HgCl2后第2日,其肾血流量下降,SCr水平急剧升高至176.8μmol/L以上,并持续多天;BUN水平在注射后第3日可升高至5304~6188/μmol/L以上;24h肌肝清除率显著降低;24h肌肝、尿素氮总排出量显著减少。注射HgCl2后3~5d内动物明显少尿,以后紧接着多尿;尿中可出现蛋白质并有各类管型,以注射后3~5d最为明显。肉眼病理检查模型动物肾脏明显肿大,重量增加(肾指数增大),肾皮质缺血,髓质淤血。镜下病理组织学观察显示,主要是肾近曲小管变性、坏死。低剂量汞中毒时,仅表现肾近曲小管直部上皮细胞的坏死;当大剂量汞中毒时,则近曲小管其他节段也可发生坏死。本模型复制方法简单易行,病变较稳定。

蛇毒诱导肾功能衰竭模型
实验方法
体重300g左右的雄性成年大鼠,经其静脉按0.4mg/kg体重的剂量一次性注射蝮蛇毒素,即可制备成急性肾功能衰竭模型。按实验预定时间分别采血作血液生化测定,并取肾脏组织标本,经固定液固定后,作常规组织切片,置光镜下检查。

模型特点
静注蛇毒液后,模型大鼠的尿量和GFR迅速下降,尿钠排泄分数也显著降低,48h后GFR仍低于注射前,但尿量略有增加。镜下病理组织学观察显示,肾远曲小管及集合小管出现坏死,表现为小管上皮细胞脱落、胞核溶解和消失;肾小球毛细血管襻节段性坏死、大量纤维素沉积及中性粒细胞浸润。注射48h后,肾小球组织形态可恢复正常,但肾小管坏死仍清晰可见。管腔内尚可见大量红细胞管型。

阿霉素诱导肾功能衰竭模型
实验方法
体重为200g左右成年大鼠,经大鼠尾静脉按6mg/kg体重的剂量一次注射阿霉素(adriamycin, ADR)。分别于实验预定时间收集尿液测定,并采血作血生化指标测定。动物处死后,取肾脏标本置于固定液中固定,作常规组织切片,光镜下观察。并作电镜标本,行透射电镜观察。

模型特点
模型动物于注射后第7日可产生大量蛋白尿,第14日时蛋白尿更明显,同时可出现大量腹水,并出现低蛋白血症、高胆固醇血症。镜下病理组织学观察肾小管和肾小球均可发生轻微病理改变。电镜下超微结构显示,毛细血管内皮细胞及足细胞肿胀,足突融合变平。

氟.化.钠诱导肾功能衰竭模型
实验方法
体重约为200g左右成年大鼠,经口按135mg/kg体重的剂量一次性灌服氟.化.钠,即可制备出ARF模型。观察氟.化.钠诱导的急性肾中毒情况,并作相关尿液生化指标测定。

模型特点
可明显观察到氟.化.钠诱导的大鼠急性肾中毒情况,随观察时间延长,模型动物的尿量明显增加,尿中氟化物、a-谷胱甘肽-S-转移酶(a-GST)、N-乙酰-β- D-葡萄糖(NAG)及肌酸酐浓缩物含量均发生变化。

顺铂诱导肾功能衰竭模型
实验方法
体重约为200g左右成年大鼠,经大鼠尾静脉按6mg/kg体重的剂量一次性注射顺铂,或将顺铂10mg/kg体重溶于1ml生理盐水中单次腹腔注射。注射后分别于预定时间经尾静脉采血作血SCr、BUN测定,于注射后第6、10日麻醉处死动物,取其肾脏标本置于10%中性甲醛液中固定,经石蜡包埋后,作常规组织切片,切片行HE染色,光镜下病理学观察。

模型特点
注射后模型大鼠血SCr、BUN显著升高,镜下肾组织病理学观察肾脏髓质外侧大部分肾小管坏死,小管上皮细胞坏死、脱落,细胞核固缩、溶解、消失,小管管腔扩张,腔内有脱落碎屑。注射后第6、10日肾组织病理改变基本相似。

需确认的信息
1. 模型种属(大鼠还是小鼠或是其他种属)
2. 动物体重有无要求,年龄有无要求
3. 雌雄有无要求
4. 模型构建具体方案
5. 取材要求(采血、取组织样本)

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