常用甲基-硝基-亚硝.基.胍(N-methyl-N'-nitro-nitrosoguanidine,MNNG)和甲基胆蒽(methylcholanthrene,MC)。MNNG为多环碳氢化合物,有强烈的致癌作用,还能使组织产生氧化氮而加重细胞恶性转化。MC是强烈的直接致癌剂,不依赖于酶的代谢作用,直接作用于胃肠道黏膜,尤其口服对胃有较高的致癌特性。
造模机制
常用甲基-硝基-亚硝.基.胍(N-methyl-N'-nitro-nitrosoguanidine,MNNG)和甲基胆蒽(methylcholanthrene,MC)。MNNG为多环碳氢化合物,有强烈的致癌作用,还能使组织产生氧化氮而加重细胞恶性转化。MC是强烈的直接致癌剂,不依赖于酶的代谢作用,直接作用于胃肠道黏膜,尤其口服对胃有较高的致癌特性。
实验方法
1. MNNG诱发大鼠胃腺癌 选用Wistar雄性大鼠,体重100g,自由饮水,加入0.01%的MNNG(100μg/ml),隔日一次,实验过程不再给予其他饮水。此外,还可用甲基亚硝.基.醋酸尿素给BD大鼠饮水中加2mg/kg体重,每周5次饮用,520天后全部大鼠均发生了胃腺癌。
2. MNNG诱发小鼠胃腺癌 选用昆明小鼠,体重18~22g,以500μg/ml MNNG溶液灌喂小鼠,3次/周,0.4ml/次,12个月后增至0.6ml。
3. MC诱发大鼠胃腺癌 选用Wistar大鼠,体重120~200g,无菌手术后,在腺胃黏膜面穿挂含 MC的线结,含MC的线结是用普通细线在一端打结后,将一束线结置于盛有MC小玻璃试管内,在乙醇灯上微微加热,使MC液化渗入线结,MC浓度为50~100mg,每条线结合有MC约5mg,无菌条件下打开腹腔,在腺胃前壁做长为2~3mm的切口,缝针自切口进入胃腔,然后从幽门小弯侧黏膜向肌层和浆膜穿出并打结固定,术后禁食半天。
4. MC诱发小鼠胃癌 取20g左右小鼠,无菌手术下,在腺胃黏膜面穿挂含MC线结。含MC的线结是用普通细线,在一端打结后,将线结置于盛有MC小玻璃试管内,在乙醇灯上微微加温,使MC液化渗入线结。MC浓度为0.05~0.1g 20-甲基胆蒽内浸入10~20根线。手术埋线后4~8个月可诱发成功胃癌。用不对称亚硝胺,剂量为0.25ml/kg体重,3个月后全部动物发生前胃乳头状癌,7~8个月后有85%~100%发生前胃癌。昆明种最敏感,A系次之,615系小鼠敏感性最差。
模型特点
MNNG诱发大鼠胃癌的发生率为80%左右,以高分化腺癌为主,可发生肝和肩部淋巴结转移。MNNG诱发小鼠胃腺癌诱发率为23%,以高分化腺癌为主,可能同时诱发前胃癌和十二指肠肿瘤。MC可使全部动物3个月后发生前胃乳头状癌,7~8个月发生胃腺癌,致癌率为85%~100%。
MC ,MNNG诱导,周期非常长约1年或更长,所以一般使用裸鼠接种。
需确认的信息
1. 模型种属(大鼠还是小鼠或是其他种属)
2. 动物体重有无要求,年龄有无要求
3. 雌雄有无要求
4. 模型构建具体方案
5. 取材要求(采血、取组织样本)