masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。
Masson染色简介:
Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染)或绿色(被亮绿所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染,肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。
Masson染色实验意义:
1. 可用于器官硬化性疾病的观察:如肝硬变、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。
2. 可用于瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者为阴性。
3. 可用于骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别:利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱,纵横交错,后者较规则。
实验步骤:
1. 石蜡切片脱蜡至水。
2. 铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。
3. 依次自来水和蒸馏水洗。
4. 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。
5. 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。
6. 蒸馏水洗。
7. 用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9. 1%磷钼酸水溶液分化3-5min。
10. 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。
11. 以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12. 95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
实验结果:
胶原纤维呈蓝色;胞质、肌纤维、红细胞呈红色;胞核黑蓝色。
实验技巧:
1. 控制好染色步骤。
2. 组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3. 0.2%冰.醋.酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳。
4. 磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。
样片参考: