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天狼猩红染色

天狼猩红是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。其溶剂为衬染PA饱和溶液,主要用于各种组织病变时,对胶原纤维异常或纤维增生的组织纤维染成红色。

天狼猩红染色简介:
天狼猩红是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。其溶剂为衬染PA饱和溶液,主要用于各种组织病变时,对胶原纤维异常或纤维增生的组织纤维染成红色。

天狼猩红染色实验意义:
主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。

实验步骤:
1. 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯 I 20min-二甲苯II 20min-无水乙醇I 10min-无水乙醇II 10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
2. 天狼猩红染液浸染:将水洗过的切片入天狼猩红染液浸染1h。
3. 酒精分化脱水:片子直接入纯酒精分化脱水。
4. 透明封片:二甲苯I 5min-二甲苯II5min中脱水透明,中性树胶封片。

染色结果:
应用偏光显微镜观察胶原纤维:
I型胶原纤维:紧密排列,很强双折光性,纤维呈红色;
II型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈多种颜色网状分布;
III型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈绿色;
III型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈淡黄色。

实验技巧:
1. 天狼猩红染色易掉色,应及时封片。
2. 注意染液的使用情况。

样片参考:





偏振光


偏振光

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