番红O固绿染色(软骨)在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中,常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中,起源于上世纪60年代的番红O(safranin O)-固绿(fast green)染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐。软骨呈红色,成骨呈绿色。
番红O固绿染色服务介绍
番红O固绿染色(软骨)在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中,常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中,起源于上世纪60年代的番红O(safranin O)-固绿(fast green)染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐。软骨呈红色,成骨呈绿色。
番红O固绿染色实验意义
番红O固绿染色染色是针对软骨及植物进行染色的方法,此方法简易,节约时间、用具器皿及药品,染色清晰。
实验步骤:
1.软骨染色步骤:
①骨组织固定、脱钙,制成石蜡切片。
②切片常规脱蜡至水。
③入新鲜配制的weigert染液染色。
④流水冲洗。
⑤酸性乙醇分化液分化。
⑥蒸馏水洗。
⑦在固绿染色液内浸染。
⑧蒸馏水洗。
⑨入番红O染液内浸染。
⑩蒸馏水洗。
⑪用乙酸溶液洗涤切片,以便去除残留的固绿,再用蒸馏水洗。
⑫分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
⑬二甲苯透明,中性树脂封固。
⑭镜检。
2.植物染色步骤:
①标本的处理:固定,切成石蜡切片。
②粘片。
③脱蜡:二甲苯→50%二甲苯+50%乙醇→100%乙醇→95%乙醇→85%乙醇→70%乙醇→50%乙醇→30%乙醇→水。
④入番红O染色液染色。
⑤酸性乙醇分化液分化15s。
⑥脱色:35%乙醇→50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇。
⑦水洗1min。
⑧入固绿染色液内浸染,蒸馏水洗1min。
⑨无水乙醇脱水3-5min,无水乙醇脱水,50%二甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。
⑩树脂封固。
染色结果:
(1)软骨染色结果:
软骨基质深红色;软骨细胞核蓝色;细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色。
(2)植物染色结果:
木质化、木栓化的细胞壁染成红色;纤维素细胞壁染成绿色;导管染成红色,筛管染成绿色。
实验技巧:
(1)软骨染色:
固绿与胶原纤维结合,不宜褪色,番红o-固绿染色的分化很关键,分化过度容易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深。
(2)植物染色:
番红染色后,在50%乙醇中脱色需经实践,如果脱色不够绿色会不好染;脱色过度会导致红色过淡,甚至全部绿色。
番红O固绿染色样片参考: