钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过嗜银染色,钙离子受到强光还原,由金属银沉积取代,呈现黑色。
VonKossa染色实验原理:
钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过嗜银染色,钙离子受到强光还原,由金属银沉积取代,呈现黑色。
VonKossa染色实验步骤:
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗,蒸馏水洗三遍。
2、XSY反应:切片滴加XSY溶液,用紫外灯连续照射2-3小时,蒸馏水洗多遍;
3、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
4、伊红染色:85%、95%的酒精梯度脱水各5min,入伊红染液5min;
5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
VonKossa染色实验结果:
钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色。
大鼠胸主动脉Von Kossa染色
注意事项:
1、XSY溶液滴染前,切片必须用蒸馏水洗干净;
2、如果没有紫外灯,也可以用强太阳光照射。