在进行动物血生化检测时需要注意饮食、采集、血样处理、检测方法和数据处理等方面。只有在严格遵守相关规范和伦理要求的情况下,才能保证实验结果的可靠性和科学性。
大鼠是常用的实验动物之一,许多实验需对其血液中相关指标进行分析检测,血液采集的质量和数量直接影响实验结果。
以需要血液样本量大时的两种常用取血方法举例:戊巴比妥钠麻醉后腹主静脉取血和断头取血
1. 糖、脂肪、蛋白代谢指标:
两种取血方法对中糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和尿酸(UA)含量有明显差异;
甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)变化不明显。
2. 肝肾功能指标:
两种取血方法对谷丙转氨酶(GOT)和谷草转氨酶(GPT)活性影响较大;
对肾功能指标中的尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)影响不明显。
3. 能量代谢指标:
两种取血方法对能量代谢指标中的乳酸(LAC)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CKMB)含量均有明显影响。
综上,取血方法不同,血液生化很多指标都出现差异。
4. 影响因素分析:
①麻醉药物的影响:
不同麻醉药物可不同程度的引起大鼠静脉血血气、电解质及能量代谢产物的改变。
戊巴比妥钠作为麻醉剂,应用广泛。SD 大鼠用戊巴比妥钠麻醉后,随时间延长,体内肝肾功能、糖代谢与脂类代谢均发生变化。
②应激反应的影响:
越来越多的证据表明,在动物实验过程中,常规的实验处置手段能够引起动物的应激反应,会引起血液生化指标的改变,这也可能是造成取血方法生化指标差异的原因之一。
③血液质量的影响:
麻醉取血时得到的血液样本是静脉血,而断头取血时,多为动静脉混合血,还往往会混入淋巴液、动物的毛发等,很容易导致溶血,对一些指标造成影响。
在动物实验过程中,取血方法会对很多临床常用指标产生影响,因此在选用取血方式时要充分考虑到麻醉药物、动物应激反应、血液质量等影响因素。
在进行与糖( GLU) 、总蛋白( TP) 、白蛋白( ALB) 、尿酸( UA) 、谷丙转氨酶( GOT) 、谷草转氨酶( GPT) 、乳酸( LAC) 、乳酸脱氢酶( LDH) 、肌酸激酶( CK) 、肌酸激酶同工酶( CKMB) 、皮质醇( COR) 指标相关的实验时应注意取血方法对血液生化指标的影响。
以常用的注射类麻醉剂戊巴比妥钠、水合氯醛、氨基甲酸乙酯为例,对雄性 SD 大鼠血液学指标的影响进行分析。
1. 血液生化指标:
3种麻醉药物对大鼠总蛋白(TP)、丙氨酸转移酶(ALB)、肌酸激酶(CK)有显著影响;
戊巴比妥钠和氨基甲酸乙酯对白蛋白(ALT)有所影响;
水合氯醛和氨基甲酸乙酯可使SD大鼠血糖(GLU)显著升高。
提示:
在进行与总蛋白(TP)、丙氨酸转移酶(ALB)、肌酸激酶(CK)、白蛋白(ALT)、血糖(GLU)指标相关的实验时应注意麻醉剂对血液生化指标的影响。
2. 血液细胞学指标:
3种麻醉药导致大鼠平均红细胞体积(MCV)显著变化;
戊巴比妥钠对大鼠平均血红蛋白量(MCH)、淋巴细胞百分数(LYMPH%)、中性粒细胞百分数(NEUT%)有显著影响;
水合氯醛对大鼠红细胞分布宽度(RDW-SD)会产生影响;
氨基甲酸乙酯却对11项血液细胞指标均有显著的影响。
3. 影响因素分析
① 氨基甲酸乙酯
氨基甲酸乙酯对雄性大鼠的血液学指标影响显著。由于其本身具有致癌性,而且有实验证实氨基甲酸乙酯直接注入血中有溶血作用。因此在实验动物的全身麻醉中不推荐使用此药物。
② 水合氯醛
水合氯醛可使空腹 SD 大鼠血糖(GLU)显著升高,可能影响糖尿病动物实验中实验结果的准确性。
③ 戊巴比妥钠
戊巴比妥钠对 SD 大鼠总蛋白(TP)、丙氨酸转移酶(ALB)、肌酸激酶(CK)、平均血红蛋白量(MCH)、淋巴细胞百分数(LYMPH%)、中性粒细胞百分数(NEUT%)指标有影响。
综上所述,选择麻醉药物和麻醉方法时,在满足手术要求和保证动物安全的前提下,应考虑麻醉药物对观察指标和结果的影响。当麻醉的影响不可避免时,应了解和控制影响的程度和范围。并提供校正和分析实验结果的资料。
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