
免疫反应是由多种细胞类型参与的一个受严格调控的过程,旨在保护身体免受微生物、毒素的侵害以及避免肿瘤的形成。全球各地的研究人员旨在更深入地了解这些过程,以理解癌症、自身免疫性疾病、炎症、过敏和病毒感染背后的机制。实时活细胞动态成像技术正是一种为此提供全面数据的宝贵工具。

类器官免疫共培养是一种先进的研究手段,它结合了3D的类器官培养技术和免疫细胞,以模拟体内微环境并研究细胞间的相互作用。这种共培养策略已被广泛应用于疾病建模、药物筛选、个性化治疗、炎症机制研究、肿瘤免疫相互作用研究以及上皮-免疫细胞相互作用的研究。

活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物

细胞表型是涉及基因和蛋白表达的多个细胞过程的集合体,可大体反应出目的基因的功能。在细胞内,将某目的基因敲除、敲降、过表达,建立稳转株后,与对照细胞一起,检测细胞表型。检测基因表达改变对细胞表型的影响,可推断该目的基因的功能。

要实现基因敲除或敲低,首先需要将特定的基因操作工具(如shRNA、CRISPR-Cas系统)高效、稳定地送入靶细胞内部。病毒,作为一种天然的基因递送专家,经过科学家的改造,去除了复制和致病能力,保留了高感染效率的特性,从而成为理想的“运载工具”。

近几年,类器官研究十分火热,在信号通路机制,药筛药敏等研究中对类器官模型需求激增,其中利用crispr-cas9基因编辑技术对类器官进行敲低或敲减来造模是个不错的实验方法,今天给大家带来crispr-cas9基因编辑技术及慢病毒转染方法。

利用慢病毒(Lentivirus)载体实现外源基因递送,对二维条件下培养的大多数哺乳动物细胞有效。相比之下,在类器官的培养条件下,细胞外基质水凝胶对外源病毒感染细胞造成干扰,类器官的干细胞特性,也不利于外源基因的表达。本文介绍了经过优化的慢病毒载体高效基因转导到类器官的实验方法。

类器官是源自干细胞的三维细胞培养物,为个性化癌症治疗和精准医学带来了新机遇。然而,缺乏包括免疫细胞和基质细胞在内的肿瘤微环境(TME)是类器官技术的一个重大局限。